Das Plasmid enthält einen ORI (origin of replication) sowie eine Ampicillin-Resistenz-Kassette. Huber, Prof. Dr. Robert enhancer trap, Methode, um gering exprimierte Gene zu finden, die für Entwicklung und Morphogenese wichtig sind. Enhancer Trap Method Using a Green Fluorescent Protein Reporter Plasmid for Cloning Tissue-Specific Enhancers Active in Prostate Cells. Die Identifizierungssequenz bleibt als „Spur“ in dem Gen zurück, wo das enhancer-trap-Konstrukt eingebaut wurde, und kann dann dazu benutzt werden, die benachbarten Sequenzen zu klonieren und zu identifizieren. [wxyz], Anhäuser, Marcus (M.A.) Kirchner, Prof. Dr. Wolfgang (W.K.) By crossing such Gal4 lines with transgenic fish lines harboring various reporter genes and effector genes downstream of UAS (upstream activating sequence), specific cells can be visualized and manipulated in vivo by targeted gene expression. Wegener, Dr. Dorothee (D.W.) We report here a simple, direct and precise method for the isolation of a putative enhancer (E rtip1) for the root apex-specific transcription from a GAL4/GFP enhancer trap line J3411. gene-trap-Methode w, Abwandlung der enhancer-trap-Methode (enhancer trap), die vor allem zur Identifikation von unbekannten Genen der Maus entwickelt wurde. Marksitzer, Dr. René (R.Ma.) Littke, Dr. habil. Nörenberg, Prof. Dr. Wolfgang (W.N.) Thus, the Gal4 gene trap and enhancer trap … Enhancer Traps. Klaus (K.R.) However, insertional mutants using these methods have not been reported. Illing, Prof. Dr. Robert-Benjamin (R.B.I.) First, we developed gene trap and enhancer trap constructs carrying an engineered yeast Gal4 transcription activator (Gal4FF) and transgenic reporter fish carrying the GFP or the RFP gene downstream of the Gal4 recognition sequence (UAS) and showed that the Gal4FF can activate transcription through UAS in zebrafish. By using this system, the gene trap and enhancer trap methods have been developed. However, they do not give any information at the protein level, e.g., about the protein subcellular localization. Trapping is performed with gene trap vectors whose principal element is a gene trapping cassette consisting of a promoterless reporter gene and/or selectable genetic marker, flanked by an upstream 3' splice site (splice acceptor; SA) and a downstream transcriptional termination sequence ( polyadenylation sequence; polyA). We created 73 fish lines that carried single copy insertions of an enhancer trap construct, which contained the zebrafish hsp70 promoter and the GFP gene, in their genome and expressed GFP in specific cells, tissues and organs, indicating that the … Drossé, Inke (I.D.) Base Sequence; Cloning, Molecular/methods; Enhancer Elements, Genetic/genetics* Uhl, Dr. Gabriele (G.U.) Lentivirus is injected to the space between a single cell embryio and its zona pellucida. Paulus, Prof. Dr. Hannes (H.P.) Wenn Sie inhaltliche Anmerkungen zu diesem Artikel haben, können Sie die Redaktion per E-Mail informieren. This paper is available online free of all access charges (see http://jxb.oupjournals.org/open_access.htmlfor further details) The online version of this article has been published under an Open Access model. Landgraf, Dr. Uta (U.L.) Illerhaus, Dr. Jürgen (J.I.) [ghi] Ssymank, Dr. Axel (A.S.) Schaub, Prof. Dr. Günter A. Enhancer-trap-Linien sind z.B. However, insertional mutants using these methods have not been reported. Sie können unsere Newsletter jederzeit wieder abbestellen. Eurich, Dr. Christian (C.E.) Durch Behandlung mit dem entsprechenden Antibiotikum können die erfolgreich transformierten Organismen aus der Vielzahl von nichttransformierten Organismen ausgelesen werden, denn sie tragen ja den Selektionsmarker, der eine Resistenz gegen das jeweilige Antibiotikum vermittelt. Jahn, Dr. Ilse PMID: 12725129 [Indexed for MEDLINE] MeSH terms. Riede, Dr. habil. Zähringer, Dr. Harald (H.Z.) Fässler, Dr. Peter (P.F.) Hobom, Dr. Barbara (B.Ho.) 1993 ; Rogers et al. However, the number of well-defined LexA enhancer trap insertions remains limited. Nick, PD Dr. Peter (P.N.) An enhancer trap strategy based on P elements was used to generate transgenic Drosophila expressing different patterns of a yeast transcription activator, GAL4. Bürger, Prof. Dr. Renate (R.Bü.) However, neither an efficient transgenesis method nor a transposon technology had not been developed before 2000. Basically, in the GAL4/GFP enhancer trap system, a given T-DNA is introduced randomly into a host genome; as the T-DNA integrates downstreamly near an enhancer-dependent or -activated promoter, the activity of the promoter and/or enhancer could be detected by the visualization of the green fluorescent signals derived from GFP, whose expression is GAL4-responsive . Solche Gene werden oft nur in ganz bestimmten Geweben, oft sogar nur in einzelnen Zellen, exprimiert (Genexpression, differentielle Genexpression) und sind daher mit den üblichen molekularbiologischen Verfahren nicht zu fassen. Warnke-Grüttner, Dr. Raimund (R.W.) Cassada, Dr. Randall (R.C.) By using this method, we have identified 147 Arabidopsis enhancer trap lines in which the GUS reporter is expressed in senescing leaves but not in non-senescing ones. Now, Shima et al. The technique offers a strikingly elegant method of gaining entry into fruit fly genes. Transient GUS assays of enhancer‐trap elements indicated that the core sequence of the CaMV 35S promoter has weaker promoter activity than the longer form and that the former version of the promoter is suitable for an enhancer‐trap system in P . Culmsee, Dr. Carsten (C.C.) Wagner, Prof. Dr. Edgar (E.W.) Reiner, Dr. Susann Annette (S.R.) With enhancer traps, detailed gene expression patterns in specific tissues or cells can be characterized. Ein Stamm enthält dabei das GAL4-Konstrukt (Treiberlinie), ein zweiter Stamm enthält die UAS-Sequenz (Responderlinie). Pfaff, Dr. Winfried (W.P.) Bensel, Dr. Joachim (J.Be.) Müller, Dr. Ralph (R.Mü.) Recently, a highly efficient transgenesis method using the medaka fish Tol2 transposable element was developed in zebrafish. Jendritzky, Prof. Dr. Gerd (G.J.) Bonk, Dr. Michael (M.B.) Duffner, Dr. Klaus (K.D.) Tewes, Prof. Dr. Uwe By using these methods, we have generated a … König, Dr. Susanne (S.Kö.) In these lines, we analyzed the effects of six senescence-promoting factors: ethylene, JA, ABA, brassinosteroids, dehydration, and darkness. Riegraf, Dr. Wolfgang (W.R.) Becker-Follmann, Dr. Johannes (J.B.-F.) Leven, Prof. Franz-Josef (F.J.L.) Infos zu unserem Umgang mit Ihren personenbezogenen Daten finden Sie in unserer, Sie haben noch kein Konto? Previous studies demonstrated that NanoTrap particles lead to both 100 percent capture of protein analytes as well as an improvement of more than 100-fold in sensitivity compared to existing methods. 1988 ). Meineke, Sigrid (S.M.) Eibl-Eibesfeldt, Prof. Dr. Irenäus (I.E.) Ungleiche Verteilung, Lieferengpässe und spezielle Produktion erschweren eine globale Impfstrategie. Ganter, Sabine (S.G.) Jendrsczok, Dr. Christine (Ch.J.) Lützenkirchen, Dr. Günter (G.L.) The activity of the enhancer (fused with or without a 35S minimal promoter) was monitored by the expression and detection of reporter proteins (i.e. A reporter flanked by a weak promoter, usually carried by a P-element transposon, is transposed randomly to a large number of chromosomal locations. Enhancer sind DNA-Elemente in einem Promotor, an denen aktivierende Transkriptionsfaktoren binden und dadurch die Transkription des sich anschließenden Gens steigern. Kyrieleis, Armin (A.K.) By creating random integrations of these constructs in the genome, transgenic fish expressing the GFP gene or the Gal4 gene in specific cells, tissues or organs are … show that enhancer traps can be used successfully in mammals too. By using this method, we have identified 147 Arabidopsis enhancer trap lines in which the GUS reporter is expressed in senescing leaves but not in non-senescing ones. Ewig, Bettina (B.Ew.) Ziegler, Dr. Reinhard (R.Z.) Oelze, Prof. Dr. Jürgen (J.O.) Neub, Dr. Martin (M.N.) By using this system, the gene trap and enhancer trap methods have been developed. Manchmal wird das enhancer-trap-Konstrukt jedoch in der Nähe eines aktiven sog. Schmuck, Dr. Thomas (T.Schm.) Mohr, Prof. Dr. Hans (H.M.) Haug-Schnabel, PD Dr. Gabriele (G.H.-S.) [jkl] Lange, Prof. Dr. Herbert (H.L.) Vogt, Prof. Dr. Joachim (J.V.) Fehrenbach, Dr. Heinz (H.F.) When insertion occurs within or adjacent to a gene … Rehfeld, Dr. Klaus (K.Re.) Gärtner, PD Dr. Wolfgang (W.G.) Taking advantage of the Tol2 transposon system, we and other groups developed the Gal4 gene trap and enhancer trap methods and established various transgenic fish expressing Gal4 in specific cells. Like enhancer-trap Gal4 lines, most ET-FLPx2 lines are unlikely to be expressed specifically in the cells of one's interest. Wagner, Thomas (T.W.) Wirth, Prof. Dr. Volkmar (V.W.) Im Medizinschrank | Lavendelextrakt – Einschlafhelfer oder Geldverschwendung? Hoos, Katrin (K.H.) Wicht, PD Dr. Helmut (H.Wi.) Gärtig, Susanne (S.Gä.) Meier, Kirstin (K.M.) Grieß, Dr. Eike (E.G.) Using the green fluorescent protein (GFP) as a mobile artificial exon carried by a transposable P-element, we have developed a protein trap system. Mutke, Jens (J.M.) Winkler-Oswatitsch, Dr. Ruthild (R.W.-O.) We created 73 fish lines that carried single copy insertions of an enhancer trap construct, which contained the zebrafish hsp70 promoter and the GFP gene, in their genome and expressed GFP in specific cells, tissues and organs, indicating that the … TRAP (Abkz.) Theopold, Dr. Ulrich (U.T.) Gene‐trap and enhancer‐trap elements were constructed for both non‐homologous and homologous integration methods . Grasser, Dr. habil. [mno] steht für Telomeric Repeat Amplification Protocol.. United 328 | Was passierte am Himmel über Denver? Enhancers can activate the transcription at considerable distance in orientation‐independent manner; therefore, the approach is the most effective for monitoring gene activity throughout the genome. Enhancer Trap Line Browser. Gack, Dr. Claudia (C.G.) Panholzer, Bärbel (B.P.) Das Enhancer-Trap-Verfahren ist eine molekularbiologische Methode, um transgene Organismen zu erzeugen, die ein Transgen nur in bestimmten Zellen exprimieren, ohne dass es dabei nötig ist, Promotoren zu kennen, die für diesen Zelltyp spezifisch wären. We report here development of an enhancer trap method by using the Tol2 transposable element and identification and characterization of insertional mutants. Diese Reportergene werden nun mit einem sog. Kindt, Silvan (S.Ki.) Trapping is performed with gene trap vectors whose principal element is a gene trapping cassette consisting of a promoterless reporter gene and/or selectable genetic marker, flanked by an upstream 3' splice site (splice acceptor; SA) and a downstream transcriptional termination sequence ( polyadenylation sequence; polyA). Daher fordert eine Initiative, Eigentumsrechte an Covid-Impfstoffen aufzuheben. Gassen, Prof. Dr. Hans-Günter Drews, Dr. Martina (M.D.) Häbe, Martina (M.Hä.) Mühlhäusler, Andrea (A.M.) Starck, PD Dr. Matthias (M.St.) Olenik, Dr. Claudia (C.O.) Markus, Prof. Dr. Mario (M.M.) Mit Hilfe des GAL4/UAS-Systems (auch UAS-GAL4-System) können beliebige klonierte Gene gezielt in bestimmten Zellen oder Geweben exprimiert werden. Hassenstein, Prof. Dr. Bernhard (B.H.) Gläser, Dr. Birgitta (B.G.) In these lines, we analyzed the effects of six senescence-promoting factors: ethylene, JA, ABA, brassinosteroids, … Infos zu unserem Umgang mit Ihren personenbezogenen Daten finden Sie in unserer Datenschutzerklärung. bei Untersuchungen zur Entwicklung des pflanzlichen Wurzelmeristems (Bildungsgewebe) oder zur Entwicklung des Nervensystems bei Fruchtfliegen (u.a. Dafür wird auf dem Vektor zusammen mit dem enhancer-trap-Konstrukt ein Selektionsmarker (meist ein Gen für Antibiotika-Resistenz) und eine im Zielorganismus natürlicherweise nicht auftretende Identifizierungssequenz (ein sog. Hierzu wird ein GAL4-Konstrukt mit Hilfe eines transponiblen Elements an einer zufälligen Stelle in das Genom des Zielorganismus eingebracht. Insektenschutzgesetz | Wie viel Gift darf's denn sein? An enhancer trap is a method in molecular biology. Liedvogel, Prof. Dr. Bodo (B.L.) Kattmann, Prof. Dr. Ulrich (U.K.) Lay, Dr. Martin (M.L.) Narberhaus, Ingo (I.N.) Enhancer (engl. Weltweit mehren sich die Studien, dass Insekten verschwinden: Wildbienen, Schmetterlinge, Käfer... Was das für die Natur und uns bedeutet. Collatz, Prof. Dr. Klaus-Günter (K.-G.C.) However, the function of most of the genes encoded by the genome has not … Schley, Yvonne (Y.S.) Schönwiese, Prof. Dr. Christian-Dietrich (C.-D.S.) Sie beeinflussen die Anlagerung des Transkriptionskomplexes an den Promotor und verstärken somit die Transkriptionsaktivität eines Gens. B. das white-Gen, zur Identifizierung der Transformanten, eine Polylinker Sequenz (enthält diverse Restriktionsschnittstellen) und ein E. coli Plasmid, zur Klonierung von flankierender genomischer DNA. enhancer trap, Methode, um gering exprimierte Gene zu finden, die für Entwicklung und Morphogenese wichtig sind. Definition A type of DNA construct containing a reporter gene sequence downstream of a promoter that is capable of integrating into random chromosomal locations in mouse. Illes, Prof. Dr. Peter (P.I.) Emschermann, Dr. Peter (P.E.) Zöller, Thomas (T.Z.) [stuv] Ob Biene oder Wanze, Fliege oder Käfer: Die sechsbeinigen Insekten gehören zu den artenreichsten Tiergruppen überhaupt. A description of how enhancer trapping works, including implications of the process in research. To identify enhancer trap patterns in the inflorescence, kanamycin resistant T1 seedlings (i.e. Eisenhaber, Dr. Frank (F.E.) Enhancer trap strategy: Recently, a method for detecting and studying enhancers has been developed called enhancer trap mutagenesis. Schmeller, Dr. Dirk (D.S.) Authors; Authors and affiliations ; Fujiko Watt; Peter Molloy; Protocol. GAL4 ist ein hefespezifischer Transkriptionsfaktor, der unter der Kontrolle eines schwachen Promotors steht und für das Protein GAL4 codiert. Ziegler, Prof. Dr. Hubert Franzen, Dr. Jens Lorenz (J.F.) Zompro, Dr. Oliver (O.Z.). Leinberger, Annette (A.L.) Springt es dabei in die Nähe der Enhancerregion eines Gens, wird durch den Enhancer sowohl dieses Gen als auch das GAL4-Gen aktiviert. Gene trap and enhancer trap methods using transposon or retrovirus have been recently described in zebrafish. Maier, Prof. Dr. Uwe (U.M.) In Drosophila, enhancer trap has been the preferred insertional mutagenesis method for over a decade (16–20). Mit Hilfe des GAL4/UAS-Systems (auch UAS-GAL4-System) können beliebige klonierte Gene gezielt in bestimmten Zellen oder Geweben exprimiert werden. Mack, Dr. Frank (F.M.) Das könnte Sie auch interessieren: Spektrum.de Digitalpaket: Kommunikation. Lahrtz, Stephanie (S.L.) Zeltz, Dr. Patric (P.Z.) Solche Gene werden oft nur in ganz bestimmten Geweben, oft sogar nur in einzelnen Zellen, exprimiert ( Genexpression , differentielle Genexpression ) und sind daher mit den üblichen molekularbiologischen Verfahren nicht zu fassen. Denn er hat, als erstes und bislang einziges Insekt, Gene von seinen Opfern übernommen. Born, Prof. Dr. Jan (J.Bo.) Enhancer traps and gene traps are reporter gene constructs that can respond to cis-acting transcriptional signals when integrated into chromosomal DNA (reviewed in 4, 5). Hanser, Dr. Hartwig (H.Ha.) enhance "verstärken" dt. Irmer, Juliette (J.Ir.) Jerecic, Renate (R.J.) Enhancer trap lines were generated in Columbia glabrous1 plants via vacuum infiltration using Agrobacterium strain ASE that contained the pD991 enhancer trap vector ( Bechtold et al. Quantenmechanik | Der schnellste Zufallszahlengenerator, der je gebaut wurde, Innovativer Hautaufkleber | OLED-Tattoo könnte schmücken und warnen, Künstliche Intelligenz | »Go Explore« knackt die noch verbliebenen Atari-Spiele. Die Nachkommen enthalten in allen Zellen die GAL4 und UAS-Sequenzen, wobei das dem UAS nachgeschaltete Gen nur in den Zellen exprimiert wird, in denen auch GAL4 aktiv ist. It is probable that GFP enhancer trap lines such as those detailed in this report may have considerable utility in advancing these methods. DNA-tag) mit eingefügt. This method utilizes a recombinant transposon construct that can be inserted at essentially random sites within the genome and that, when inserted near an enhancer, will Hohl, Dr. Michael (M.H.) Scholtyssek, Christine (Ch.S.) Originally described in bacteria, enhancer trapping was first demonstrated using bacteriophage transposable elements to insert a reporter gene at scattered sites throughout the E. coli genome (Casadaban and Cohen 1979; Bellofatto et al. Steffny, Herbert (H.St.) Transient GUS assays of enhancer‐trap elements indicated that the core sequence of the CaMV 35S promoter has weaker promoter activity than the longer form and that the former version of the promoter is suitable for an enhancer‐trap system in P . A traditional enhancer trap strategy using the Tg(10×UAS:Kaeda, cryaa:Venus)cq65 line was performed for comparison. of the enhancer trap technique. Ravati, Alexander (A.R.) Geinitz, Christian (Ch.G.) Müller, Wolfgang Harry (W.H.M.) Seibt, Dr. Uta Riemann, Prof. Dr. Dieter Hartmann, Prof. Dr. Rüdiger (R.H.) selten auch Transkriptionsverstärker genannt) sind Abschnitte mit charakteristischer Basenabfolge in der eukaryotischen DNA, die (wie auch die Silencer), zu den cis-Elementen gehören. PMID: 12725129 [Indexed for MEDLINE] MeSH terms. Fix, Dr. Michael (M.F.) In Problem 6, you learned about the enhancer trap ping method used in Drosophila research. Weber, Dr. Manfred (M.W.) Top; Browser; Data; Methods; About Us ; Contact; Lentiviral transgenesis. The method relies on the use of a phenotypic marker as the enhancer reporter. Wandtner, Dr. Reinhard (R.Wa.) We report here development of an enhancer trap method by using the Tol2 transposable element and identification and characterization of insertional mutants. Flemming, Alexandra (A.F.) In enhancer traps, a promoter, usually a P-transposable element, is inserted into the genome together with a reporter gene such as lacZ and GAL4. GAL4 ist ein hefespezifischer Transkriptionsfaktor, der unter der Kontrolle eines schwachen Promotors steht und für das Protein GAL4 codiert. Grüttner, Dr. Astrid (A.G.) Reportergene benutzt. Schaller, Prof. Dr. Friedrich Eine Übersicht. First, we developed gene trap and enhancer trap constructs carrying an engineered yeast Gal4 transcription activator (Gal4FF) and transgenic reporter fish carrying the GFP or the RFP gene downstream of the Gal4 recognition sequence (UAS) and showed that the Gal4FF can activate transcription through UAS in zebrafish. Arnheim, Dr. Katharina (K.A.) Enhancer trap lines were generated in Columbia glabrous1 plants via vacuum infiltration using Agrobacterium strain ASE that contained the pD991 enhancer trap vector ( Bechtold et al. Probst, Dr. Oliver (O.P.) Neumann, Prof. Dr. Herbert (H.N.) Das Enhancer-Trap-Verfahren ist eine molekularbiologische Methode, um transgene Organismen zu erzeugen, die ein Transgen nur in bestimmten Zellen exprimieren, ohne dass es dabei nötig ist, Promotoren zu kennen, die für diesen Zelltyp spezifisch wären. Wissenschaftler diskutieren über ein »Anthropozän« als Zeitalter, das entscheidend durch den Menschen geprägt wurde. Laurien-Kehnen, Dr. Claudia (C.L.) Enhancer Trapping Explained - YouTube. An enhancer trap construct carries a reporter gene with minimal promoter that is induced once it lands under control of a chromosomal enhancer (Bellen, 1999). It is probable that GFP enhancer trap lines such as those detailed in this report may have considerable utility in advancing these methods. Dabei wird ein promotorloses ( Promotor ) Reportergen via embryonaler Stammzellen in die Keimbahn der Maus eingeschleust. Kaspar, Dr. Robert Roth, Prof. Dr. Gerhard We created 73 fish lines that Sauermost, Rolf (R.S.) Hierzu wird ein GAL4-Konstrukt mit Hilfe eines transponiblen Elements an einer zufälligen Stelle in das Genom des Zielorganismus eingebracht. We have developed a large-scale method for screening enhancer trap lines for genes up-regulated during leaf senescence. 1, January 2002 (© 2002) Factor Analysis of Olfactory Responses in Drosophila melanogaster Enhancer-Trap Lines as a Method for Ascertaining Common Reception Components for Different Odorants Fernando Martin,1 Min-Su Kim,2 Bernard Hovemann,2 and Esther Alcorta1,3 Received 3 Mar. Hierzu wird ein GAL4-Konstrukt mit Hilfe eines transponiblen Elements (Enhancer-Trap-Element) an einer zufälligen Stelle in das Genom des Zielorganismus eingebracht.

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